蛋白质组学

iTRAQ-蛋白质定量组学

   
iTRAQ (Isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation)即等重标签标记用于蛋白质相对和绝对定量技术。该技术可实现对多种不同样品中蛋白的比较,如用于研究不同病理条件下或者不同发育阶段的组织样品中蛋白质表达水平的差异。

iTRAQ试剂的结构示意图

iTRAQ试剂包括3个部分:报告基团(report group)、平衡基团(balance group)和肽反应基团(amine-specific reactive group)。报告基团相对分子质量为113-121Da(无120),因此iTRAQ 试剂可同时标记8 组样品。平衡基团相对分子质量为192-184Da(无185),使得八种iTRAQ试剂分子量均为305Da,保证标记的同一肽段m/z 相同。 肽反应基团将iTRAQ试剂与肽段上赖氨酸及N端氨基酸残基相连,在其上报告基团通过平衡基团与反应基团相连,形成等量异位标签。

技术路线

iTRAQ技术的技术流程

技术优势

iTRAQ 可于一次实验中同时标记 4 至 8 个的样品,操作简单快速,减少多次质谱检测中产生的系统误差。适用于对多个样品进行高通量的检测,实验设计更加灵活。

iTRAQ 是在肽段水平上进行的体外标记,适用于多种有类型的生物样本。

重现性好、灵敏度高、定性与定量可同时进行。

检测限低,可检测出低丰度蛋白。

技术平台

   
Triple TOF 5600, Q-Exactive, Orbitrap Fusion™ Tribrid™

应用领域:

机理和调控机制研究

动态过程中机制研究

疾病标志物的筛选

用药及预后标志物筛选

(0)

热评文章

发表评论