蛋白质组学

蛋白质浓度测定

蛋白质浓度测定是利用化学或物理方法测定蛋白质的浓度,是往往用于计算纯化方法的回收率的重要方法。正常值

人体正常值一般是 60 - 80 g/L。

临床意义异常结果: (1) 双缩脲法:双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法,硫铵不干扰显色, Cu2+与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成紫蓝色络合物,此物在540nm波长处有最大吸收。双缩脲法常用于0.5g/L-10g/L含量的蛋白质溶液测定。 (1) Lowry法:Cu+与蛋白质在碱性溶液中形成络合物,然后这个络合物还原磷钼磷-磷钨酸试剂(福林-酚试剂),结果得到深蓝色物。此法比双缩脲法灵敏得多,适合于测定20mg/L-400mg/L含量的蛋白质溶液。 (1) 紫外吸收法:大多数蛋白质在280nm波长处有特征的最大吸收,这是由于蛋白质中有酪氨酸,色氨酸和苯丙氨酸存在,可用于测定0.1-0.5mg/ml含量的蛋白质溶液。 需要检查的人群:有软弱无力疲乏、困倦,皮肤、黏膜苍白,注意力不集中的人群。

注意事项不合宜人群:有明显出血倾向的人群。 检查前禁忌:检查前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。体检前一天的晚八时以后,应禁食。 检查时要求:抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难。测定中,蛋白-染料复合物会有少部分吸附于比色杯壁上,实验证明此复合物的吸附量是可以忽略的。测定完后可用乙醇将蓝色的比色杯洗干净。

检查过程(1) 标准法制定标准曲线 取14支试管,分两组按下表a平行操作。 绘制标准曲线:以A595nm为纵坐标,标准蛋白含量为横坐标,在坐标纸上绘制标准曲线。 (2) 微量法制定标准曲线 取12支试管,分两组按下表b平行操作。 绘制标准曲线:以A595nm为纵坐标,标准蛋白含量为横坐标,在坐标纸上绘制标准曲线。 (3) 未知样品蛋白质浓度测定 测定方法同上,取合适的未知样品体积,使其测定值在标准曲线的直线范围内。根据所测定的A595nm值,在标准曲线上查出其相当于标准蛋白的量,从而计算出未知样品的蛋白质浓度(mg/ml)。

相关疾病小儿蛋白质-能量营养不良,小儿脆性X染色体,病毒性肝炎

相关症状营养不良

1本词条内容贡献者为:

陈麟凤 - 副主任医师 - 北京世纪坛医院 输血科

(0)

关键词:

热评文章

发表评论