蛋白质组学

EGFR胞外区是否具有酪氨酸激酶活性?

R&D公司的recombinant human EGF Receptor来源于DNA编码的人类EGFR的胞外区,而酪氨酸激酶活性区在胞内,我现在需要做酪氨酸激酶抑制剂的筛选,不知道能不能用这个蛋白?筛选原理:
以多聚酪氨酸多肽为底物,用EGFR催化酪氨酸的磷酸化,用酶标记的单克隆抗体检测酪氨酸磷酸化程度,以OPD做为辣根过氧化物酶底物显色,从而筛选EGFR抑制剂。附上EGFR说明书和图。
请各位指点啊!

EGFR图示

胞外区没有激酶活性,只是胞外区的结构会调节EGFR的激酶活性。对于药物筛选来说,你要选择的是酪氨酸激酶,我们现在用的是Invitrogen的产品,货号是SKU# PV3872,你可以查查。
你在选产品的时候一定要选激酶,不要选重组蛋白,因为重组蛋白不一点都是激酶,有的是用来做标准品或ELISA等其他用途的。对于激酶, CST和Invitrogen都有卖,别的公司也有,这个我就不太清楚了,不过个人感觉Invitrogen的比较好.

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