蛋白质组学

Pierce推出更快更彻底的新品去垢剂

 

Thermo Scientific Pierce近日推出了HiPPR去垢剂去除离心柱/离心板,可更快更彻底地从细胞裂解液及其他生物样品中去除去垢剂。这种即用型的产品适用于低浓度的蛋白及多肽样品。HiPPR树脂结合并去除去垢剂,同时很好地回收蛋白及多肽,便于下游的质谱分析。

Pierce推出更快更彻底的新品去垢剂

大家都知道,去垢剂和表面活性剂是制备蛋白和多肽样品时常常使用的成分。然而,它们也会干扰下游的ELISA、等电聚焦和质谱分析。请神容易送神难!从多肽样品中去除去垢剂颇具挑战性,也很关键,因为即使是极低浓度的去垢剂也会污染仪器,干扰柱结合、洗脱和多肽离子化。

HiPPR其实是High Protein and Peptide Recovery的缩写,意味着蛋白及多肽的高效回收。离心柱或96孔离心板所用的HiPPR去垢剂去除树脂可从25-200 µL样品中高效去除去垢剂,从而改善LC-MS/MS和MALDI-MS分析的结果。

HiPPR去垢剂去除树脂是为1-100 µg/mL的蛋白浓度而优化的,可去除>95%的蛋白提取和样品制备过程中所使用的去垢剂,而蛋白和多肽损失极少。此树脂适用于常用去垢剂的去除,如浓度在0.5-1%的SDS、Triton X-100、NP-40和CHAPS。目前有预装的离心柱和离心板形式,最多可处理100 µL样品。另外,您也可以购买HiPPR Detergent Removal Spin Column Kit,其中包含树脂浆和空的离心柱,便于您自己调整样品体积。

整个处理过程相当简单,仅需15分钟。首先是离心去除保存液,之后用缓冲液平衡树脂并离心,重复三次。加入样品,孵育10分钟。离心后,即可收集到无去垢剂的样品。

对于高浓度的蛋白或多肽样品(>100 µg/mL),Thermo Scientific Pierce也提供去垢剂去除树脂,它能够与10µL-1mL样品中的高浓度去垢剂高效结合并去除,而样品损失极少。

下表显示了样品(0.1mL,含有100µg BSA 和去垢剂)经过0.5mL去垢剂去除树脂处理后,去垢剂的去除百分比以及BSA的回收率。

去垢剂 去垢剂去除(%) BSA 回收(%)
SDS,2.5% 99 95
去氧胆酸钠,5% 99 100
CHAPS,3% 99 90
Octyl glucoside,5% 99 90
Octyl thioglucoside,5% 99 95
Lauryl maltoside,1% 98 99
Triton* X-100,2% 99 87
Triton X-114,2% 95 100
NP-40,1% 95 91
Brij*-35,1% 99 97
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