蛋白质组学

DEAE—离子交换剂纯化血清IgG

 

(一)原理
离子交换是指液相中的离子与固定相上可解离基团的可逆交换反应。利用这个反应先将要分离的混合物在一定pH的溶液中解离,而后流经固定相,使之与固定相上的可解离基团进行离子交换,吸附于固定相上,凡不能进行交换吸附的成分,则流出层析柱外。再根据交换吸附于固定相上的各组分解离度的差别,运用不同的pH值或不同盐浓度的溶液作流动相,流过层析柱将各组分分别再交换洗脱下来,这样混合物的各组分即被分开,达到分离的目的,此即为离子交换层析

离子交换层析中的固定相称为离子交换剂。它是由在不溶性高分子母体上引入不同的可解离基团所构成。常用的不溶性高分子母体有纤维素、葡聚糖、琼脂 糖及人工合成的树脂等。引入于母体上的活性基团主要有酸性或碱性物质。由于引入的酸性物质可解离出H+离子,能与液相中的阳离子交换,故这类离子交换剂称为阳离子交换剂;引入的碱性物质可解离出OH-离子,能与液相中的阴离子交换,故将这类离子交换剂称为阴离子交换剂。

由于引入的酸或碱的强弱不同,两类离子交换剂又分为不同的型。
酸类物质以磺酸基(-SO3H)最强,引入磺酸基的阳离子交换剂称为强酸型;引入磷酸基(-PO3H2)、亚磷酸基(-PO2H)的称中强酸型;引入羧基(-COOH)、酚羟基(-OH)的称为弱酸型。
碱类物质主要是引入胺碱。引入季胺

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