蛋白质组学

浅析溶血对生物样本分析的影响

 溶血指的是红细胞破裂,血红蛋白逸出释放到血浆或血清中,可发生在体内和体外,影响溶血的因素也十分复杂。血浆血清发生溶血后,许多生理成分如血红蛋白、胆红素、磷脂等明显增加,这些成分可能会影响溶血样品中药物的检测。生物药物分析的样品一般为血浆或血清样品,存在被测样品少,样品复杂及干扰物质多等问题,而且在实际的生物样品分析工作中,采集的血浆或血清样品常出现溶血的现象。
在进行生物药物分析时,溶血的发生会影响待测物的色谱分离,溶血基质中可能会有一些特有的、与待测物质的共流出的内源性干扰;也可能影响待测物在质谱检测中的基质效应,甚至红细胞中释放出的酶可能影响待测物的稳定性。溶血导致的样品测定数据不准确,将直接影响药物的药动学研究,生物样本分析常包含在一些药代动力学外包机构提供的服务中。
LC-MS/MS技术的应用,可获得丰富、有效的化合物结构信息,建立快速、高效的分析研究体系,目前已成为体内生物药物分析的重要方法。血浆样本中原型药物及代谢物的LC-MS测定法及其制剂的药动学和人体生物等效性研究在药物研发中至关重要。药动学在不同方面的应用有利于为临床的安全用药提供相关依据,也能让研究者更好的了解药物特性。美迪西提供药代动力学外包服务,药代动力学实验室已经通过CFDA的GLP认证,实验研究遵循ICH、CFDA和FDA的指导原则,可以根据客户需求设计并开展体内、体外药代动力学试验,为客户提供一整套药动学评价和优化服务。
在对生物样本进行分析时,要避免血清或者血浆样品出现溶血现象,溶血的发生一般有以下原因:
(1)溶血的发生可能是由于疾病状态、生理状况等体内因素导致的。
(2)溶血的发生和样本收集过程有直接的关系,如采血针口径过小、抽血速度过快、采血点选择不当、止血带使用过久、采血管未充满、采血后过度混摇、运输过程中过度震荡等,都会造成溶血。
(3)在转运、储存过程操作不当,如传输过程中剧烈震荡;转运时间长;转运车温度过高、剧烈震荡等也会造成溶血。
其中,体外因素是造成溶血的主要原因。血浆或血清样品一般是在不同时间点采集的,涉及周期长,影响因素多,溶血样品的产生很难避免,因此研究人员需提前做好人员培训,密切关注血样采集的全过程,减少采集、离心、冻存及转移任何一个环节可能发生的溶血。
据网上报道,溶血发生后会对生物样品分析造成以下后果:
(1)影响药物的稳定性,红细胞破裂释放的酶可能造成药物在溶血血浆中不稳定,研究表明激素、维生素、吗啡等在溶血血浆中稳定性受到影响。
(2)影响与红细胞有高亲和力的药物,使测定浓度比实际浓度偏高,药物浓度可高数百倍,如轻微的溶血现象可使甲醋唑胺的浓度显著提高。
(3)影响血浆结合率高的药物,细胞内液造成药物稀释,测定浓度比实际浓度偏低。
(4)溶血使细胞生理成分增加,造成离子抑制或增强,基质效应显著,影响目标分析物的测定。
总之,对于生化检测来说,溶血现象的发生会引起检测的误差,造成检验质量下降等问题,为了提高生物药物分析的准确性,需要对溶血现象的原因进行深入的分析,并找出解决问题的办法。
 

(0)

热评文章

发表评论