蛋白质组学

凝胶过滤实验中的注意事项

凝胶过滤实验中的注意事项

蛋白纯化技术专题 1.层析柱 的选择 层析柱 大小主要是根据样品量的多少以及对分辨率的要求来进行选择。一般来讲,主要是层析柱的长度对分辨率影响较大,长的层析柱分辨率要比短的高;但层析柱长度不能过长,否则会引起柱子不均一、流速过慢等实…
限制性内切酶分类指南

限制性内切酶分类指南

重组DNA技术工具酶 限制性核酸内切酶产品选择专题 30多年前,当人们在对噬菌体的宿主特异性的限制-修饰现象进行研究时,首次发现了限制性内切酶 。细菌可以抵御新病毒的入侵,而这种"限制"病毒生存的办法则可归功于细…
Folin

Folin

  一、 目的 掌握Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法,熟悉分光光度计 的操作。 二、原理 Folin-酚试剂法包括两步反应:第一步是在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物;第二步是此络合物将磷钼酸-磷钨酸试剂(F…
辛酸-硫酸铵法从人血清中纯化IgG

辛酸-硫酸铵法从人血清中纯化IgG

  一、实验目的 1. 初步掌握从血清中提取纯化IgG的方法步骤。 2. 了解辛酸-硫酸铵法纯化IgG 的原理。 二、实验原理 辛酸—硫酸铵法分两步进行。第一步用辛酸沉淀杂蛋白,辛酸为短链脂肪酸,在酸性条件下可沉 淀血清或腹水中的白…
酵母实验操作方案

酵母实验操作方案

  一.质粒 酶切及线性化 1)用维特洁日常型小量DNA纯化试剂盒抽提9KSF2,可得到较纯的质粒10μg/3ml菌液,终体积80ul。 2)线性化质粒 使用80μl酶切体系 9KSF2质粒 70μl 内切酶(SacI, SalI,…
酵母蔗糖酶的纯化及性质研究

酵母蔗糖酶的纯化及性质研究

  一、酶的纯化 (一)实验原理 蔗糖酶(E.C.3 2.1.26)能催化非还原性双糖(蔗糖)的1,2—糖苷键裂解,释放出等量的果糖和葡萄糖。 从式中可以看到,每摩尔蔗糖水解产生两摩尔还原糖,蔗糖的裂解速率可以通过Nelson 法测…
蛋白水解酶缘何溶解不了蜘蛛丝

蛋白水解酶缘何溶解不了蜘蛛丝

  蜘蛛丝向来给人带来无限启发,蜘蛛丝与蚕丝以及各种高轻度的碳纤维相比具有明显的优势,而且还不容易被生物溶解,即使蛋白水解酶也不能将其溶解,那这其中玄机何在呢?且看下文的分析 蜘蛛丝的主要成分为丝心蛋白,它是纤维状蛋白质,主要结构是…