蛋白质组学

蛋白质的性质实验

蛋白质的性质实验

  【目的和要求】 1. 学习几种常用的鉴定蛋白质和氨基酸的方法及其原理。 2. 了解蛋白质的两性解离性质。初步学会测定蛋白质等电点的方法。 3. 加深对蛋白质胶体分子 稳定因素的认识,了解蛋白质的沉淀反应、变性作用的原理及其相互关…
蛋白质提取的方法总汇

蛋白质提取的方法总汇

1 、植物 组织蛋白质提取方法 1、根据样品重量(1g样品加入3.5ml提取液,可根据材料不同适当加入),准备提取液放在冰上。 2、把样品放在研钵中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上静置(3-4小时)。 3、用离心机离心8000r…
葡聚糖凝胶柱层析纯化PPO粗酶液

葡聚糖凝胶柱层析纯化PPO粗酶液

  一、原理 1.葡聚糖凝胶SephadexG-200凝胶柱层析 利用大分子不能进入凝胶颗粒内部最先流出柱外,而小分子物质进入凝胶颗粒内部,流速慢而最后流出柱外,凝胶层析法能将不同分子大小的物质分离开。(G-200能分离800-80…
被科学家埋没了20年的绿色荧光蛋白

被科学家埋没了20年的绿色荧光蛋白

  近年来,绿色荧光蛋白 的研究越来越受到科研工作者的重视和看好,相关的成果不断见诸各个期刊。今年头中科院生物物理所就联合北京大学通过实验获得了一系列的绿色荧光蛋白。那么,绿色荧光蛋白的前世今生有怎样的故事呢? 2008年10月8日…
表达蛋白的生物学活性的检测

表达蛋白的生物学活性的检测

  一、mtt 比色法检测细胞活性 (一)原理 活细胞内线粒体 琥珀酸脱氢酶能催化无色的MTT形成蓝色的甲肷,其形成的量与活细胞数和功能状态呈正相关。对 细胞活力有影响的表达蛋白活性检测可以通过MTT比色法进行。 (二)试剂准备 1…
改良邻苯三酚法测定超氧化物歧化酶活性

改良邻苯三酚法测定超氧化物歧化酶活性

邻苯三酚是白色有光泽结晶体,无味,在露光的空气中变成淡灰色,慢慢加热开始升华。密度1.45g/cm3。熔点13l-133℃.沸点309℃。易溶于水、醇、醚,水溶液在空气中逐渐变暗,在碱性溶液中迅速变暗,微溶于苯、氯仿、二硫化碳。剧毒…
蛋白纯化些常见问题总结

蛋白纯化些常见问题总结

蛋白纯化过程中常遇见一些问题,这里整理了下几个蛋白纯化实验中的遇见的问题及其解决方式。 1)我现在手头有个融合蛋白,纯化的时候用助溶剂溶解后做了GST亲和层析,之后用蛋白酶切割后却发现目的蛋白没有活性。 请问有哪些可能会出现这种原因…
原核表达实验前分析设计

原核表达实验前分析设计

蛋白表达技术全攻略 表达不同于其它一些实验,比如:提取质粒、PCR 、电镜切片,这些人为控制的因素比较多,出问题相对来说也比较好分析。表达呢,你把质粒克隆好啦,交给细胞,然后有些事情就不全是你要怎样就怎样了。原核表达在表达当中来说还…
亚硝酸法测定超氧化物歧化酶同工酶活性

亚硝酸法测定超氧化物歧化酶同工酶活性

超氧化物歧化酶同工酶是指催化超氧化物自由基氧离子和氢离子反应形成过氧化氢和分子氧反应,但分子结构与超氧化物歧化酶不同的酶。 超氧化物歧化酶同工酶活性测定方法有:化学发光免疫法、化学法、亚硝酸法,下面简单介绍亚硝酸法测定其活性的原理、…
多肽合成常见问题及解答

多肽合成常见问题及解答

  Q:如何保存合成的多肽? A:多肽在-20℃很稳定,特别是冷冻干燥并保存在干燥器中,在将它们暴露于空气之前, 冷冻干燥多肽可以放于室温。这将是湿度影响减少,当无法冷冻干燥时,最好的方法是以小的工作样量存放。   对于含Cys, …