蛋白质组学

蛋白质浓缩、干燥及贮存

蛋白质浓缩、干燥及贮存

  一、样品的浓缩   生物大分子 在制备过程中由于过柱纯化而样品变得很稀,为了保存和鉴定的目的,往往需要进行浓缩。常用的浓缩方法的: 小分子 减压加温蒸发浓缩 通过降低液面压力使液体沸点降低,减压的真空度愈高,液体沸点降得愈低,蒸…
甲醇酵母表达实验的注意若干事项

甲醇酵母表达实验的注意若干事项

蛋白表达技术全攻略 试验的注意事项 1、信号肽识别位点的设计 以质粒pPICZαA为例。在利用PCR反应在外源基因两端引入酶切位点的试验中。如果质粒pPICZαA双酶切中丢失了KEX2蛋白酶的…
甲硫氨酸的作用

甲硫氨酸的作用

  甲硫氨酸methionine一种含硫的非极性α氨基酸。L-甲硫氨酸是组成蛋白质的20种氨基酸中的一种,是哺乳动物 的必需氨基酸和生酮氨基酸。其侧链易氧化成甲硫氨(亚)砜。 甲硫氨酸的作用: 肝脏保护 抗肝硬变…
SPA的提取、纯化与鉴定

SPA的提取、纯化与鉴定

  (一) SPA的提取 SPA提取的方法很多,包括煮沸法、溶菌酶法、葡萄球菌溶素法、超生波法以及三氯醋酸法等。现将常用的方法介绍如下: 1.煮沸提取法 ⑴ 将菌株接种于蛋白胨葡萄糖琼脂 培养基上,37℃培养20h~24h。 ⑵ 以…
碱性磷酸单酯酶的分离、纯化实验

碱性磷酸单酯酶的分离、纯化实验

  本实验作为“大肠杆菌碱性磷酸单脂酶基因克隆、表达”的下游实验,通过对重组基因表达后的基因蛋白碱性磷酸单酯酶的提取、分离与纯化的实验操作,了解所涉及的生化技术中提取(细胞破碎)、分离(离心、盐析、过滤等)、复性(包涵体)、层析(凝…
蛋白纯化反相柱的选择

蛋白纯化反相柱的选择

蛋白纯化技术专题 HP-RPC的选择首先要看蛋白质的分子 量,20kDa左右的一般用C4或C8,再小一点的可以用C18,太大的蛋白并不适于反相分离。C18通用性最好,但是有时候保留过强可能会导致收率较低。如果目的蛋白不是很针对,可以…
免疫检测的基础知识介绍

免疫检测的基础知识介绍

  ELISA是一种免疫测定。免疫测定(immunoassay,IA)是应用免疫学技术测定标本的方法。在临床检验中主要通过抗原 抗体反应检测体液中的抗体或抗原性物质。 1.1 抗原 抗原是能在机体中引起特异性免疫 应答的物质。抗原进…
His.Tag序列蛋白纯化法宝之HIS*BIND的选择

His.Tag序列蛋白纯化法宝之HIS*BIND的选择

蛋白纯化技术专题 各种His.Bind基质的产品如何选择:本文介绍带Ni NTA琼脂 糖、无Ni IDA琼 脂糖、带Ni的IDA琼脂糖预装柱、无Ni IDA触须甲酰化、带Ni的IDA纤维素预装筒、带Ni的IDA磁性琼脂糖……等His…
融合蛋白的表达系统常见问题

融合蛋白的表达系统常见问题

蛋白表达技术全攻略 研究者们在分离到某一基因后,要对其编码蛋白质进行研究最理所当然的工作就是表达――即:有目的性地合成外源基因产物.在重组 DNA技术的发展早期,人们认为在基因的前面有一个强启动子和一个起始密码子就足以在大肠杆菌中获…