蛋白质组学

小鼠β

小鼠β

  动物组织 RNA 的提取 实验目的: 掌握由动物组织中提取总RNA的方法 实验原理: Trizol试剂是一个包含酚、异硫氰酸胍和SDS的单相酸性溶液,其在裂解细胞的同时抑制RNase的活性,随后加入氯仿,酚会大量的溶解在氯仿中。…
噬菌体展示技术的原理及噬菌体展示系统

噬菌体展示技术的原理及噬菌体展示系统

蛋白表达技术全攻略 噬菌体展示技术是将外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,使外源基因随外壳蛋白的表达而表达,同时,外源蛋白随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术。到目前为止,人们已开发出了单链丝…
胰蛋白酶的纯化

胰蛋白酶的纯化

  [原理] 胰蛋白酶与另外两种蛋白水解酶:糜蛋白酶(胰凝乳蛋白酶)和弹性蛋白酶同时存在于胰脏中。由于胰蛋白酶、糜蛋白酶和弹性蛋白酶的酶蛋白分子在结构上及其它很多性质上的相似之处,往往在一般的制备过程中很难将它们彼此彻底分开,传统的…
原核表达宿主体系选择指南

原核表达宿主体系选择指南

蛋白表达技术全攻略 在原核蛋白表达 过程中,选择构建一个合适原核表达体系需要综合考虑3大因素:表达载体、宿主菌株、表达诱导条件,以获得最满意的表达效果.事实上,在平时的实验中,最容易被忽视的就是宿主菌的选择――多数人会直接选择自己实…
蛋白质序列分析和结构预测

蛋白质序列分析和结构预测

  【实验目的】 1、掌握蛋白质序列检索的操作方法; 2、熟悉蛋白质基本性质分析; 3、熟悉基于序列同源性分析的蛋白质功能预测,了解基于motif、 结构位点、结构功能域数据库的蛋白质功能预测; 4、了解蛋白质结构预测。 【实验内容…
经典Lowry–Folin法测定液体样品中蛋白质含量

经典Lowry–Folin法测定液体样品中蛋白质含量

  一、 实验目的 1、 了解测定蛋白质的常用方法 2、 掌握蛋白质含量测定的经典Lowry – Folin法。 二、 实验原理 在碱性溶液中,蛋白质中的肽键与铜盐可产生双缩脲反应,产生络合物,此络合物会将磷钼酸-磷钨酸试剂还原,产…
植物组织蛋白质提取方法

植物组织蛋白质提取方法

  1、植物 组织蛋白质提取方法 1、根据样品重量(1g样品加入3.5ml提取液,可根据材料不同适当加入),准备提取液放在冰上。2、把样品放在研钵中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上静置(3-4小时)。3、用离心机离心8000rp…
蛋白质电泳-在蛋白质组学中的应用

蛋白质电泳-在蛋白质组学中的应用

  原 理 蛋白质分子 在溶液中由于其末端氨基、末端羧基及侧链的游离基团而成为带电颗粒,并可在电场内移动,其移动方向取决于蛋白质分子所带静电荷。不同蛋白质分子根据其氨基酸组成及所在溶液的pH值,携带的静电荷不尽相同,致使它们在电场中…
细胞色素b5的测定

细胞色素b5的测定

细胞色素b5存于高等动物内质网膜的一种细胞色素。可从兔肝微粒体中提纯。因为与膜结合,用蛋白酶或表面活性剂处理可以使其溶解。还原型和氧化型的最大吸收光谱分别为555、526、423和414毫微米,分子量为12500,氧化还原电位+0.…