蛋白质组学

蛋白质电泳-在蛋白质组学中的应用

蛋白质电泳-在蛋白质组学中的应用

  原 理 蛋白质分子 在溶液中由于其末端氨基、末端羧基及侧链的游离基团而成为带电颗粒,并可在电场内移动,其移动方向取决于蛋白质分子所带静电荷。不同蛋白质分子根据其氨基酸组成及所在溶液的pH值,携带的静电荷不尽相同,致使它们在电场中…
Ecoli原核表达的实验原理/材料/

Ecoli原核表达的实验原理/材料/

蛋白表达技术全攻略 一、原理 1、E .coli 表达系统 E .coli 是重要的原核表达体系。在重组 基因转化入E .coli 菌株以后,通过温度的控制,诱导其在宿主菌内表达目的蛋白质,将表达样品进行SDS-PAGE 以检测表达…
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳试剂准备与操作步骤

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳试剂准备与操作步骤

  一、原理 细菌体中含有大量蛋白质,具有不同的电荷和分子量。强阴离子去污剂SDS与某一还原剂并用,通过加热使蛋白质解离,大量的SDS结合蛋白质,使其带相同密度的负电荷,在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)上,不同蛋白质的迁移率仅取决于…
肾上腺素自动氧化测定超氧化物歧化酶活性

肾上腺素自动氧化测定超氧化物歧化酶活性

肾上腺素是由肾上腺髓质分泌的一种儿茶酚胺激素。在应激状态、内脏神经刺激和低血糖等情况下,释放入血液循环,促进糖原分解并升高血糖,促进脂肪分解,引起心跳加快。肾上腺素(adrenaline,epinephrine,AD)是肾上腺髓质的…
细胞色素b5的测定

细胞色素b5的测定

细胞色素b5存于高等动物内质网膜的一种细胞色素。可从兔肝微粒体中提纯。因为与膜结合,用蛋白酶或表面活性剂处理可以使其溶解。还原型和氧化型的最大吸收光谱分别为555、526、423和414毫微米,分子量为12500,氧化还原电位+0.…
葡聚糖凝胶柱的使用方法

葡聚糖凝胶柱的使用方法

蛋白纯化技术专题 1 Sephadex G型葡聚糖凝胶只适合在水中使用,Sephadex G-25羟丙化后就是Sephadex LH-20。其既有分子 筛作用,在由极性与非极性溶剂组成的溶剂中还有反相层析效果。虽然价位很高,但由于性…
丝氨酸的作用

丝氨酸的作用

  丝氨酸是一种非必需氨基酸,它在脂肪和脂肪酸的新陈代谢及肌肉的生长中发挥着作用,因为它有助于免疫血球素和抗体的产生,维持健康的免疫系统也需要丝氨酸。丝氨酸在细胞膜 的制造加工、肌肉组织和包围神经细胞的鞘的合成中都发挥着作用。 1、…
利用沉淀实验测定蛋白质等电点

利用沉淀实验测定蛋白质等电点

  蛋白质在PH等于等电点时,溶解度最小。本文主要介绍了利用沉淀实验测定蛋白质等电点的实验原理、器材、试剂和具体操作步骤。   蛋白质PH位于等电点时溶解度最低 一、蛋白质等电点的测定 1、目的 (1)了解蛋白质的两性解离性质。 (…
如何选择合适的蛋白含量测定方法?

如何选择合适的蛋白含量测定方法?

LOWRY法蛋白定量专题 对许多实验来说,确定蛋白样品浓度是至关重要的。如果在2D电泳中,蛋白过多或过少,产生的后果都将是相当严重的。大多数蛋白样品可通过比色测定法定量。在典型的蛋白测定中,化学试剂加入到蛋白样品溶液里产生颜色变化,…