蛋白质组学

酵母双杂交实验常见问题及其解决方法

酵母双杂交实验常见问题及其解决方法

酵母双杂交技术专题 1.如果诱饵蛋白对酵母细胞是有毒的,该怎么办? 在某些情况下,在液体培养基中培养不好的菌珠可以在固体培养基上生长得很好。首先重悬克隆 于1ml的SD/–Trp,接着将重悬液平铺于5 个100-mm的SD/–Trp…
蛋白质分离纯化

蛋白质分离纯化

  蛋白质的分离纯化 (一)材料 1、选材 2、破碎 3、混合物的分离 (二)粗分级 (三)细分级 (四)结晶 蛋白质的分离方法 根据蛋白质的溶解度差异分离 —沉淀技术 根据蛋白质分子 大小的差异分离 根据蛋白质的荷电差异分离 根据…
DEPC太危险了 还是蛋白酶K吧

DEPC太危险了 还是蛋白酶K吧

解析蛋白酶活性测定 聚焦蛋白酶研究新进展 当大家都全副武装,冒着生命危险使用致癌的DEPC时,是否有想过,其实,还有更安全环保的替代品——蛋白酶 K 的妙用,那么蛋白酶 K 的威力何在,使用过程中该注意哪些方面呢?本文从互联网上摘得…
氨基酸的离子交换柱色谱分离

氨基酸的离子交换柱色谱分离

  【原 理】 本实验采用磺酸型阳子交换树脂(732型)分离酸性氨基酸(天冬氨酸Asp pI=2.97)和硷性氨基酸(赖氨酸Lys pI=9.74)的混合液。在pH5.3条件下,因为低于Lys的pI值,Lys可解离成阳离子挂在树脂上…
高效液相色谱法测定单胺氧化酶活性

高效液相色谱法测定单胺氧化酶活性

单胺氧化酶(monoamine oxidase )为催化单胺氧化脱氨反应的酶。缩写MAO,也有称为含黄素胺氧化酶的。 EC1.4.3.4。作用于一级胺及其甲基化的二、三级胺,也作用于长链的二胺。对所谓生物胺,即酪胺、儿茶酚胺、5-羟…
Folin—酚法测定血清蛋白的含量

Folin—酚法测定血清蛋白的含量

  Folin—酚法蛋白质含量测定法是最为灵敏的方法,但其试剂也不容易配制。本实验的主要目的是掌握分光光度计 的使用方法,学习Folin—酚法测定血清蛋白的含量。 一、目的 1、学习分光光度计 的原理和使用方法。 2、学习Folin…
Western Blot杂交膜转移与免疫显色

Western Blot杂交膜转移与免疫显色

  主要包括以下 4 个基本步骤:样品制备;电泳分离;蛋白的膜转移;免疫 杂交与显色――蛋白检测。 溶液和试剂 1. 1X 磷酸盐缓冲液(PBS ) 2. ModifiedRIPAbuffer:Tris-HCl:50 mM, pH …
蛋白质结构和功能的重难点

蛋白质结构和功能的重难点

蛋白质的结构与功能作用 一、蛋白质的生物学功能 蛋白质是生命的物质基础,没有蛋白质就没有生命,生物体结构越复杂,其蛋白质种类和功能越繁多, 其主要的生物学功能是: (一)催化和调节能力 某些蛋白质是酶,催化生物体内的物质代谢反应。 …
分光光度计维护方法说明

分光光度计维护方法说明

紫外可见分光光度计讲座 分光光度计是实验室检测核酸或者蛋白样品浓度最常用的工具之一。仪器使用频繁,但甚少见到有人维护。其实,保持分光光度计清洁、无污染是成功操作的关键。Jessica Geisler博士是eppendorf 北美地区…