蛋白质组学

免疫沉淀技术的原理和抗体选择

免疫沉淀技术的原理和抗体选择

  随着生物技术的发展,蛋白质与基因之间的互作逐渐成为科研人员的关注热点,染色免疫 沉淀技术由此而生,并被应用到各个科研领域当中。本文聚焦染色质免疫沉淀技术的原理、应用和抗体选择等问题,让您对其有更全面的了解和认识。 随着人类基因组…
磷酸化蛋白的免疫印迹检测经验总结

磷酸化蛋白的免疫印迹检测经验总结

磷酸化蛋白的western blotting检测是信号通路研究中的经典方法。然而,有时会遇到一些问题,例如,磷酸化抗体检测不到总蛋白,不知道如何使用lysis buffer,Western blot高背景等。本文总结了论坛上的高手整…
蛋白转运功能之血红蛋白

蛋白转运功能之血红蛋白

蛋白质的结构与功能作用 血红蛋白是高等生物体内负责运载氧的一种蛋白质。也是红细胞中唯一一种非膜蛋白。人体内的血红蛋白由四个亚基构成,分别为两个α亚基和两个β亚基,在与人体环境相似的电解质溶液中血…
毕赤酵母蛋白不表达的原因

毕赤酵母蛋白不表达的原因

蛋白表达技术全攻略 很多朋友问这样一个问题:为什么毕赤酵母不表达? 他们自己也很纳闷,重组酵母PCR 检测也证明目的基因重组了,但是诱导之后就是在表达上清中检测不到目的蛋白,仔细研究操作手册后仍然不知道原因。 本人,根据自己的经验,…
BSA在内切酶缓冲液中的作用

BSA在内切酶缓冲液中的作用

它们都是BSA BSA 在内切酶的缓冲液的作用有三个。 1.BSA是酶的稳定剂,防止酶的分解和非特异性吸附; 2.BSA能减轻有些酶的变性,能减轻有些不利环境因素如加热,表面张力及化学因素引起的变性的至于作用机理我不是很清楚,可能是…
蛋白质纯化的方法选择

蛋白质纯化的方法选择

蛋白纯化技术专题 蛋白质纯化的方法选择 随着分子生物学的发展,越来越多的科研人员熟练掌握了分子生物学的各种试验技术,并研制成套试剂盒,使基因克隆表达变得越来越容易。但分子生物学的上游工作往往并非是最终目的,分子克隆与表达的关键是要拿…
三种融合蛋白表达系统常见问题

三种融合蛋白表达系统常见问题

  研究者们在分离到某一基因后,要对其编码蛋白质进行研究最理所当然的工作就是表达――即:有目的性地合成外源基因产物。在重组DNA 技术的发展早期,人们认为在基因的前面有一个强启动子和一个起始密码子就足以在大肠杆菌中获得很好的表达。随…
纸层析法:分离鉴定氨基酸实验

纸层析法:分离鉴定氨基酸实验

  纸层析法是生物化学上分离、鉴定氨基酸混合物的常用技术,可用于蛋白质的氨基酸成分的定性鉴定和定量测定。本文主要介绍了纸层析法分离鉴定氨基酸的实验原理、器材和具体操作步骤。   纸层析法 一、目的 通过氨基酸的分离,学习纸层析法的基…
酵母表达外源蛋白

酵母表达外源蛋白

  1、 菌株 用GS115表达不出蛋白,换KM71H后,大部分克隆 能表达。 2、温度:  在28度和室温下诱导表达,表达水平可能都不低。 3、pH 手册上用6.0,pH提高到6.8,不表达的蛋白可能就表达出来。BMMY的pH7.…