蛋白质组学

纸层析法:分离鉴定氨基酸实验

纸层析法:分离鉴定氨基酸实验

  纸层析法是生物化学上分离、鉴定氨基酸混合物的常用技术,可用于蛋白质的氨基酸成分的定性鉴定和定量测定。本文主要介绍了纸层析法分离鉴定氨基酸的实验原理、器材和具体操作步骤。   纸层析法 一、目的 通过氨基酸的分离,学习纸层析法的基…
酵母表达外源蛋白

酵母表达外源蛋白

  1、 菌株 用GS115表达不出蛋白,换KM71H后,大部分克隆 能表达。 2、温度:  在28度和室温下诱导表达,表达水平可能都不低。 3、pH 手册上用6.0,pH提高到6.8,不表达的蛋白可能就表达出来。BMMY的pH7.…
酚试剂(Lowry)法测血清蛋白质含量

酚试剂(Lowry)法测血清蛋白质含量

  一、 相关理论 1、 血清(浆)蛋白质是血清(浆)固体成分中含量最多、组成复杂、功能广泛的一类化和物。 2、 血清(浆)蛋白质的分类: 目前已研究的有300 余种,已分离提纯的有100 余种,大部分在肝脏合成。 1) 盐析法可将…
优化生物工艺研发的创新性技术定量分析蛋白聚集体

优化生物工艺研发的创新性技术定量分析蛋白聚集体

蛋白聚集严重影响以蛋白为基础研发的药物。在药物制剂中,蛋白聚集在生物活性和免疫原性方面影响药效。蛋白聚集发生在生产过程的各个阶段包括细胞培养、纯化、生产、储存、运输等方面。制药工业希望在生物工艺中找到新的方法,可用于检测、追踪、定量…
蛋白质的性质(一)蛋白质及氨基酸的呈色反应

蛋白质的性质(一)蛋白质及氨基酸的呈色反应

  一、目的: 1、了解构成蛋白质的基本结构单位及主要连接方式 2、了解蛋白质和某些氨基酸的呈色反应原理 3、学习几种常用的鉴定蛋白质和氨基酸的方法 二、呈色反应 (一)双缩脲反应: 1、原理:尿素加热至180℃左右,生成双缩脲并放…
原核表达(原理、材料与实验方案)

原核表达(原理、材料与实验方案)

  一、原理 1、 E . coli 表达系统 E . coli 是重要的原核表达体系。在重组基因转化入E . coli 菌株以后,通过温度的控制,诱导其在宿主菌内表达目的蛋白质,将表达样品进行SDS-Page 以检测表达蛋白质。 …
蛋白质抽提大全

蛋白质抽提大全

  蛋白样品的获得主要包括破碎法、沉淀法、蛋白溶解等,可以根据实验目前选择最合适的方法,本文主要总结了蛋白抽提的仪器和材料的准备,试剂溶液的配制以及具体的操作步骤。 蛋白提取方法 1 材料和方法 1.1 材料 1.1.1 组织和细胞…
毕式酵母表达常见的问题及其解析

毕式酵母表达常见的问题及其解析

蛋白表达技术全攻略 1、问:我用毕式酵母表达一个27KD的蛋白,小量表达并做SDS-PAGE有一条类似三聚体的条带。用大量表达,表达上清用镍柱进行亲和层析 ,在FPLC上可以看到一个大峰,但跑电泳却没有发现条带,为什么呢?请赐教 参…
蛋白防御功能之免疫球蛋白

蛋白防御功能之免疫球蛋白

蛋白质的结构与功能作用 免疫球蛋白 (英文:immunoglobulin,ig)是一组具有抗体活性的蛋白质,ig由浆细胞产生,主要存在于生物体血液和和其他体液(包括组织液和外分泌液)中,约占血浆蛋白总量的20%;还可分布在b细胞表面…