蛋白质组学

紫外分光光度法测定蛋白质含量

紫外分光光度法测定蛋白质含量

  摘要: 考马斯亮兰G250与蛋白质结合,在0-1000ug/ml范围内,于波长595nm处的吸光度与蛋白质含量成正比,可用于蛋白质含量的测定。考马斯亮兰G250与蛋白质结合迅速,结合产物在室温下10分钟内较为稳定,是一种较好的蛋…
在大肠杆菌(E.Coli)表达蛋白产物

在大肠杆菌(E.Coli)表达蛋白产物

  一、原理 1、 E . coli 表达系统 E . coli 是重要的原核表达体系。在重组基因转化入E . coli 菌株以后,通过温度的控制,诱导其在宿主菌内表达目的蛋白质,将表达样品进行SDS-Page 以检测表达蛋白质。 …
EGFR胞外区是否具有酪氨酸激酶活性?

EGFR胞外区是否具有酪氨酸激酶活性?

yan0495 R&D公司的recombinant human EGF Receptor来源于DNA编码的人类EGFR的胞外区,而酪氨酸激酶活性区在胞内,我现在需要做酪氨酸激酶抑制剂的筛选,不知道能不能用这个蛋白?筛选原理:…
氨基比林N脱甲基酶活性测定

氨基比林N脱甲基酶活性测定

氨基比林又名匹拉米洞, Pyramidon, Amidozon, Aminophenazon, Aminopyrine,由氨基安替比林经催化氢化(烃化)而得, 解热镇痛作用较强,缓慢而持久,消炎抗风湿作用与阿司匹林相似。本品因能引起…
LORRY法蛋白定量的实验步骤和需知事项

LORRY法蛋白定量的实验步骤和需知事项

  蛋白定量 的方法主要有以下三种:BCA法、考马斯亮蓝法和Lorry法。其中LORRY法蛋白定量也就是利用菲林-酚试剂法对蛋白质含量进行测定的实验方法。本文主要对其实验步骤进行介绍。 [原 理] 斐林(Folin)-酚试剂法结合了…
大肠杆菌蛋白表达纯化的策略

大肠杆菌蛋白表达纯化的策略

蛋白表达技术全攻略 大肠杆菌 表达蛋白以可溶和不溶两种形式存在,需要不同的纯化策略。现在,许多蛋白质正在被发现而事先并不知道它们的功能,这些自然需要将蛋白质分离出来后,进行进一步的研究来获得。 分析蛋白质的方法学现已极大的简化和改进…
SPA提取IgG

SPA提取IgG

  (一) 原理 将SPA偶联至Sepharose-4B上后,利用亲和层析 来提取人和某些动物的IgG,这样可以省去制备第二抗体。该法特别适用于单克隆抗体的研究。该法提取IgG与利用IgG纯化SPA原理是一致的。 (二) 材料与试剂…
肝药酶Lowry比色法测定

肝药酶Lowry比色法测定

Lowry比色法是蛋白质测定最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试…
IPTG诱导pET载体目的蛋白表达的原因分析

IPTG诱导pET载体目的蛋白表达的原因分析

  1)噬菌体DE3溶源化的菌株如BL21(DE3)是最常用的表达菌株,噬菌体DE3是λ噬菌体的衍生株,构建好的表达载体可以直接转入表达菌株中,诱导蛋白的表达方式与lac启动子一样都是IPTG诱导。 2)表达菌…