蛋白质组学

Invitrogen公司的Pichia酵母表达系统使用总结

Invitrogen公司的Pichia酵母表达系统使用总结

蛋白表达技术全攻略 甲醇酵母表达系统有不少优点,其中以Invitrogen 公司的Pichia酵母表达系统最为人熟知,并广泛应用于外源蛋白的表达。虽然说酵母表达操作简单表达量高,但是在实际操作中,并不是每个外源基因都能顺利得到高表达…
初学者的western blot操作步骤大全

初学者的western blot操作步骤大全

  2011年鄙人做western的时候,发现目前的资料都很老,网上的资料也大多互相传抄,说法各异,于是综合了目前网上所能找到的资料和个人实际经验,编辑了这份western blot 操作步骤2012版,内容包括主要操作步骤和所需要…
双缩脲试剂测定蛋白质含量

双缩脲试剂测定蛋白质含量

  一、原理:蛋白质含有两个以上的肽键,因此有双缩脲反应。双缩脲反应是指蛋白质在碱性溶液中与二价铜离子结合,生成紫红色络合物的反应。其颜色的深浅与蛋白质的含量成正比,而与蛋白质的相对分子质量 和氨基酸的组成无关。 二、材料与试剂 双…
实验室离心机离心管分类

实验室离心机离心管分类

生物学离心机 实验室 离心机 离心管种类有多种。 1、按材质可分:塑料离心管 、玻璃离心管和不锈钢离心管等。 2、按速度可分:低速离心管和高速离心管。 3、按容量可分:微量离心管、小容量离心管和大容量离心管。一般称容量大于100mL…
真核细胞常见的表达载体

真核细胞常见的表达载体

蛋白表达技术全攻略 真核细胞常见表达载体 1. pCMVp-NEO-BAN载体 特点: 该真核细胞表达载体分子 量为6600碱基对,主要由CMVp启动子、兔β-球蛋白基因内含子、聚腺嘌呤、氨青霉素抗性基因和抗neo…
蛋白质氨基酸残基组成分析以及蛋白预测软件

蛋白质氨基酸残基组成分析以及蛋白预测软件

  氨基酸是蛋白质的基础组成单位,通过研究蛋白质中氨基酸的性质和组成来预测蛋白质的结构和功能,蛋白质氨基酸残基组成分析主要是通过氨基酸分析仪来完成的,本文推荐了2个基于氨基酸组成进行蛋白质预测软件 。 基于氨基酸组成的蛋白质预测软件…
邻苯三酚法测定超氧化物歧化酶活性

邻苯三酚法测定超氧化物歧化酶活性

邻苯三酚是白色有光泽结晶体,无味,在露光的空气中变成淡灰色,慢慢加热开始升华。密度1.45g/cm3。熔点13l-133℃.沸点309℃。易溶于水、醇、醚,水溶液在空气中逐渐变暗,在碱性溶液中迅速变暗,微溶于苯、氯仿、二硫化碳。剧毒…
酵母双杂交实验项目操作及心得体会

酵母双杂交实验项目操作及心得体会

酵母双杂交技术专题 1.构建CaM诱饵质粒 ① PCR 扩增CaM基因的开放阅读框,正向和反向引物分别加接酶切位点。 ② 扩增得到的CaM插入T载体( T–CaM) 。 ③ T–CaM和pGBKT7 质粒分别双酶切。 ④ 胶回收目的…
凝胶层析法蛋白质脱盐

凝胶层析法蛋白质脱盐

  一、原理:含盐蛋白质溶液流经凝胶层析柱 时,低相对分子 量的盐分子 因浸入凝胶颗粒的微孔中,所以向下移动的速度较慢;而大分子的蛋白质不能进入凝胶颗粒的微孔,以较快的速度流过凝胶柱,从而使蛋白质与盐分开。 二、材料与试剂:葡聚糖凝…