蛋白质组学

蛋白质与多肽提取分离

蛋白质与多肽提取分离

  1 分离方法 采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括:盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析 、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这…
AKTA快速蛋白分离系统与HPLC 的优劣比较

AKTA快速蛋白分离系统与HPLC 的优劣比较

  HPLC 优点:高压 速度快 分析精度高 所需样本量少,主要用于分析 纯化多肽类 缺点:柱子较贵 有些需要用乙氰甲醇等有毒有害试剂 不能或只能纯化 很小量的蛋白 AKTA 系统 优点: 中低压 容易放大 可大规模纯化蛋白类 常规…
DEAE—离子交换剂纯化血清IgG

DEAE—离子交换剂纯化血清IgG

  (一)原理 离子交换是指液相中的离子与固定相上可解离基团的可逆交换反应。利用这个反应先将要分离的混合物在一定pH的溶液中解离,而后流经固定相,使之与固定相上的可解离基团进行离子交换,吸附于固定相上,凡不能进行交换吸附的成分,则流…
蛋白产物的检测实验

蛋白产物的检测实验

  一、组织蛋白的裂解提取: 1.分别取-70℃保存的各组动物的样品(半个脑、0.5g肌肉),放入小离心管中,在冰浴上以PBS 充分洗涤2次,除去残留血液。 2.用无菌手术剪和镊子将大鼠肌肉剪碎(脑样品不用剪碎),放入另一小离心管中…
多肽物质分离与分析方法研究进展

多肽物质分离与分析方法研究进展

    摘 要 综述了近几年来多肽类物质的提取分离与分析方法,主要包括高效液相色法、电泳、质谱及核磁共振等方法在肽类物质研究中的最新应用进展。   多肽类化合物广泛存在于自然界中,其中对具有一定生物活性的多肽的研究,一直是药物开发的…
蛋白质双向电泳过程与体会

蛋白质双向电泳过程与体会

  双向电泳IEF (sigma)IEF(not IPG)/SDS-PAGE最简单的装备推荐如下,适合于没多少money做IPG又想做“热”的所谓蛋白质组 的,嘻嘻! IEF用Biorad的圆盘电泳槽 (不行用国产的吧,不推荐),S…
蛋白质分析技术

蛋白质分析技术

  第一节 蛋白质分离纯化与鉴定的基本原理 一、蛋白质的理化性质 (一)蛋白质的两性电离 pI:当蛋白质溶液处于某一pH时,蛋白质解离成正、负离子的趋势相等,即成为兼性离子,净电荷为0,此时的溶液的pH称为~。 体内大多数蛋白质:p…
多克隆抗体制备服务

多克隆抗体制备服务

之抗体制备 由多种抗原 决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混扎在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗体就是多克隆抗体。 技术服务 详细描述 蛋白水平技术服务 抗体制备 多克隆抗体制备 简介: 抗原刺激机…
蛋白质纯化经验总结

蛋白质纯化经验总结

蛋白纯化技术专题 1)我现在手头有个融合蛋白,纯化的时候用助溶剂溶解后做了GST亲和层析 ,之后用蛋白酶切割后却发现目的蛋白没有活性。 请问有哪些可能会出现这种原因?怎么解决?测过基因序列,没有问题。细胞破碎后,融合蛋白在沉淀里,我…
细菌蛋白萃取试剂(B

细菌蛋白萃取试剂(B

  编辑按:本文主要介绍了细菌 蛋白萃取试剂的原理和特点 The most efficient, gentle method available for lysing bacterial E.coli Cell s B-PER Ba…