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蛋白质纯化经验总结

蛋白质纯化经验总结

蛋白纯化技术专题 1)我现在手头有个融合蛋白,纯化的时候用助溶剂溶解后做了GST亲和层析 ,之后用蛋白酶切割后却发现目的蛋白没有活性。 请问有哪些可能会出现这种原因?怎么解决?测过基因序列,没有问题。细胞破碎后,融合蛋白在沉淀里,我…
蛋白质提取与纯化技术

蛋白质提取与纯化技术

  选择材料及预处理   以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识,但基本原理不…
蛋白质纯化的方法选择

蛋白质纯化的方法选择

蛋白纯化技术专题 蛋白质纯化的方法选择 随着分子生物学的发展,越来越多的科研人员熟练掌握了分子生物学的各种试验技术,并研制成套试剂盒,使基因克隆表达变得越来越容易。但分子生物学的上游工作往往并非是最终目的,分子克隆与表达的关键是要拿…
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介!

蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介!

蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介!   1、纯化的一般目标和方法   首先,自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。   然后进…